Mempelajari Tentang Sentrifugasi

Table of Contents

Infolabmed.com. Sentrifugasi adalah proses yang memanfaatkan gaya sentrifugal untuk sedimentasi campuran dengan menggunakan mesin sentrifuga atau pemusing. Komponen campuran yang lebih rapat akan bergerak menjauh dari sumbu sentrifuga dan membentuk endapan (pelet), menyisakan cairan supernatan yang dapat diambil dengan dekantasi. Teknik sentrifugasi telah dimanfaatkan baik untuk keperluan penelitian, misalnya pada bidang biologi sel dan biologi molekular, maupun untuk industri, misalnya dalam pengayaan uranium dan pengolahan anggur. (Wikipedia; Sentriufugasi)

 

Prinsip,
Ketika suatu benda bergerak melingkar dengan cepat, akan dihasilkan gaya yang menjauhkan benda tersebut dari pusat lintasan geraknya (Gbr. 3.35). Untuk menghitung gaya sentrifugal relatif (relative centrifugalforce, ref) sebuah centrifuge, tentukan radius (r) lengan rotor (dalam cm) dan jumlah putaran per menit (revolutions per minute, rpm) kemudian gunakan rumus di bawah ini.

Sebagai contoh, bila radius 25 cm dan rpm 1300 putaran/menit, rcf-nya sekitar 50 g.

Komponen centrifuge (GbL 3.36)
Komponen sebuah centrifuge terdiri atas:

• kumparan sentral (A) yang berputar dengan kecepatan tinggi;
• kepala centrifuge (E), terliksasi ke kumparan sentral, dengan wadah tabung;
• tabung (T) berisi suspensi yang akan disentrifugasi.

Ketika kumparan berputar, gaya sentrifugal bekerja pada tabung. Tabung berayun ke posisi horizontal dan partikel-partikel dalam suspensi terdorong ke dasar tabung. Partikel-partikel terkonsentrasi di dasar tabung. Partikel-partikel ini membentuk "konsentrat" yang dapat dipisahkan dari "supernatan" dan kemudian diperiksa. Konsentrat dapat mengandung:

• sel-sel darah;
• telur parasit (dalam feses yang diencerkan);
• sel-sel saluran kemih (dalam urine).

JENIS - JENIS SENTRIFUGE

Centrifuge manual (Gbr. 3.37)

Centrifuge ini digerakkan secara manual dengan memutar sebuah engkol. Alat ini dapat memuat dua atau empat buah tabung. Centrifuge manual dapat digunakan:

• untuk memeriksa konsentrat urine;
• untuk mengonsentrasikan parasit tertentu dalam feses.

Kecepatan centrifuge ini tidak adekuat untuk memisahkan eritrosit dari plasma (dalam darah) secara sempurna.

Perhatian:

• Kunci centrifuge dengan kuat di atas permukaan yang stabil (tepi sebuah meja).
• Seimbangkan kedua tabung yang terletak berseberangan seperti dijelaskan dalam petunjuk  pemakaian, bagian 3.3.3·
• Jaga jarak Anda sewaktu menjalankan centrifuge.
• Untuk menghentikan mesin, jangan mengurangi kecepatan putaran engkol. Tarik engkol dengan mantap menjauhi mesin.
• Angkat tabung perlahan-lahan dan hati-hati (agar tidak merusak endapan).
• Engkol dilumasi secara berkala.

Peringatan: Centrifuge manual dapat menyebabkan kecelakaan berat. Jadi, ikuti petunjuk-petunjuk diatas dengan hati-hati. 

Centrifuge elektrik
Centrifuge elektrik lebih akurat dibandingkan centrifuge manual dan dianjurkan penggunaannya bila memungkinkan. Terdapat dua jenis kepala centrifuge elektrik, kepala "ayun" ("swing-out" head) dan kepala "sudut" ("angle" head).

Kepala "ayun" (Gbr. 3.38)
Kepala jenis ini dirancang untuk mengayun tabung ke posisi horisontal selama sentrifugasi. Jenis ini paling sering digunakan.

Kepala "sudut" (Gbr. 3.39)
Kepala jenis ini menahan tabung pada sudut sekitar 45° selama sentrifugasi. Jenis ini berguna untuk teknik pemeriksaan tertentu, mis., uji aglutinasi dalam penentuan golongan darah metode tabung reaksi.

Wadah tabung
Terdapat beberapa jenis wadah tabung centrifuge elektrik (Gbr. 3-40). Pemilihan wadah tabung tergantung pada model centrifuge:

• wadah yang dirancang hanya untuk memuat satu tabung;
• wadah yang memuat dua tabung;
• wadah yang memuat sembilan tabung kecil (tabung presipitan), dll.

Beberapa jenis centrifuge juga dilengkapi dengan pengatur waktu (timer):

• pengatur waktu yang menghentikan alat secara otomatis sesuai waktu yang telah diatur (mis., 5 atau 10 menit);
• bilik pendingin yang mencegah pemanasan spesimen selama sentrifugasi;
• Penghitung rpm, yaitu cakram dengan jarum yang menunjukkan kecepatan mesin selama sentrifugasi (komponen ini berguna untuk beberapa metode pengonsentrasian parasit).

Centrifuge dengan baterai
Centrifuge mini yang dijalankan dengan baterai kadang-kadang dipakai untuk menentukan volume packed cell dalam pemeriksaan hematologi.

CARA MENGGUNAKAN SENTRIFUGE

Memasang centrifuge
Centrifuge harus diletakkan dengan alas karet atau karpet di atas permukaan yang datar.

Menyeimbangkan tabung
Bilatabung dinomori, tempatkan tabung-tabung terse but seperti gambar 3-41:
- tabung 1 berseberangan dengan tabung 2;
- tabung 3 berseberangan dengan tabung 4.

Seimbangkan tabung-tabung yang berseberangan dengan menimbang tabung-tabung tersebut berikut wadahnya menggunakan neraca dua-piringan.
Untuk menyeimbangkan: tambahkan suspensi yang akan di-sentrifugasi ke dalam tabung yang lebih ringan (Gbr. 3.42); atau tambahkan air ke dalam wadah temp at tabung yang lebih ring an (gunakan botol semprot; Gbr. 3-43).
Bila hanya satu tabung (berisi suspensi) yang akan di-sentrifugasi, seimbangkan dengan tabung sejenis yang diisi air.

Mencegah pecahnya tabung
Alasi selalu bagian dasar wadah tabung dengan bantalan karet khusus untuk jenis centrifuge tersebut. Hal ini akan melindungi bagian dasar tabung centrifuge.
Tambahkan sedikit air di antara tabung dan wadahnya.

Pencegahan bahaya

• Periksa apakah ukuran tabung tepat bagi centrifuge. Tabung yang terlalu panjang atau pendek dapat pecah.
• Isi tabung tidak melebihi tiga perempat volume maksimal untuk mencegah tumpahan ke dalam wadah.
• Seimbangkan selalu wadah tabung sebelum memulai sentrifugasi. Bila hal ini tidak dilakukan, dapat memboroskan pemakaian alat dan centrifuge dapat bergerak sewaktu sentrifugasi.
• Pastikan bahwa centrifuge tertutup sebelum memulai sentrifugasi.
• Ketika mulai menjalankan centrifuge, tingkatkan keeepatan seeara bertahap dengan memutar tombol perlahan-lahan sampai batas kecepatan yang dikehendaki.
• Hentikan centrifuge secara bertahap (beberapa model centrifuge dilengkapi dengan rem untuk tujuan ini). Jangan sekali-kali mencoba memperlambat centrifuge dengan tangan Anda.
• Jangan sekali-kali membuka centrifuge sebelum alat benar-benar sudah berhenti.
• Angkat tabung perlahan-lahan dan hati-hati.

Cara membersihkan dan perawatan
Untuk keterangan rinci mengenai cara membersihkan dan merawat centrifuge, lihat bagian 3.5.3

Sumber 

WHO . 2003. Pedoman Dasar Untuk Laboratorium Kesehatan (Manual of Basic Techniques for A Health Laboratory) ; Edisi 2. Penerbit EGC