Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
Table of Contents
Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia. Alkaline phosphatase (ALP) ditemukan di banyak jaringan, termasuk tulang, hati, usus, ginjal, dan plasenta. Pengukuran serum ALP sangat menarik dalam penyelidikan dua kelompok kondisi: penyakit hepatobiliary (hepatitis, sirosis atau keganasan) dan penyakit tulang yang berhubungan dengan peningkatan aktivitas osteoblastik (rakhitis anak dengan defisiensi vitamin D, penyakit Paget, hiperparatiroidisme dalam kerangka, metastasis karsinoma).
Prinsip Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
Metode yang dioptimalkan berdasarkan rekomendasi DGKC (German Society of Clinical Chemistry, 1972) dan SCE (Scandinavian Society of Clinical Chemistry).
Dalam larutan basa, ALP mengkatalisis hidrolisis p-nitrofenil fosfat menjadi p-nitrofenol dan fosfat.
Laju pembentukan p-nitrofenol, sebanding dengan aktivitas ALP, diukur pada 405 nm.
Reagen Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
R1 ALKALINE PHOSPHATASE Buffer
D.E.A. (Diethanolamine) buffer pH 10 (25°C) 1 mol/L
Magnesium Chloride 0.5 mmol/L
Preservative
R2 ALKALINE PHOSPHATASE Substrate
p-nitrophenyl phosphate 10 mmol/L
Setelah dilarutkan: Reagen Kerja diklasifikasikan sebagai vial R1.
Persiapan Reagen Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
Gunakan alat yang tidak tajam untuk melepas tutup botolnya. Tambahkan segera isi vial R2 ke vial R1. Homogenkan secara perlahan dan tunggu hingga larut sempurna.
Stabilitas dan Penyimpanan Reagen
Reagen jangan sampai terkena sinar matahari langsung, tertutup rapat dalam botol asli pada 2-8°C, bila disimpan dan digunakan seperti yang dijelaskan pada insert kit, reagen akan stabil pada :
Belum dibuka:
• Sampai dengan tanggal kedaluwarsa yang tertera pada label kit.
Setelah dibuka:
• Segera menyusun kembali substrat (vial R2)
• Isi vial R1 (Buffer) stabil minimal 6 bulan.
Setelah dilarutkan:
• Transfer jumlah yang diminta dan simpan dalam botol asli pada 2-8°C.
• Reagen kerja stabil setidaknya selama 30 hari.
• Buang reagen jika keruh atau jika absorbansi pada 405 nm > 0,800.
• Jangan gunakan reagen yang kedaluwarsa.
Pengumpulan dan Penanganan Sampel Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phospatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
Serum yang tidak hemolisis atau plasma yang diheparin segera didinginkan.
Aktivitas ALP stabil dalam spesimen selama :
• 2-3 hari pada 2-8°C.
• 1 bulan pada –25 °C.
Prosedur Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
Metode Manual
Diamkan reagen dan spesimen pada suhu kamar.
|
Pipet
ke dalam kuvet termostat dengan panjang jalur 1
cm (37°C): |
|
|
Reagent |
1000 µL |
|
Standard / Control or Specimen |
10 µL |
|
Mencampur. Setelah 1 menit pada 405 nm, catat
absorbansinya setiap menit selama 3 menit. |
|
|
Hitung
perubahan absorbansi per menit (DAbs/min). |
|
Perhitungan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
Contoh, dengan Prosedur manual, (Panjang jalur 1 cm, 37°C, 405 nm):
IU/L = (DAbs/mnt) x 5450
µkat/L = IU/L / 60
Nilai Rujukkan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
Anak-anak: Nilai dapat ditingkatkan (hingga tiga kali lipat selama masa pubertas) Contoh nilai yang diberikan untuk informasi: 245-768 IUI/L 37°C
Setiap laboratorium harus menetapkan kisaran normalnya sendiri untuk populasi yang dilayaninya.
Gangguan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
Batasan Pemeriksaan Kuantitatif Alkaline Phosphatase ( DEA) dalam Serum dan Plasma Manusia
Hindari serum hemolisis.
Untuk tinjauan yang lebih komprehensif tentang faktor-faktor yang mempengaruhi pengujian ini, lihat publikasi Young D.S.
Sumber :
Biolabo. (2022). Alkaline Phosphatase ( DEA). Maizy ; France.
Baca juga :
Post a Comment