Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum, plasma, Darah Utuh atau Urin Manusia

Infolabmed

Updated: 03 Apr, 2022 • 0 • min read

Table of Contents

Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum, plasma, Darah Utuh atau Urin Manusia. Kebanyakan ahli toksikologi menganggap etanol sebagai zat kimia yang paling sering digunakan dan disalahgunakan. Oleh karena itu, pengukuran kadar etanol merupakan salah satu pengujian yang paling sering dilakukan di laboratorium toksikologi. Meskipun jarang ditemui, penting untuk memasukkan metanol, isopropanol dan aseton (suatu metabolit isopropanol) dalam baterai uji alkohol untuk evaluasi yang tepat (analisis kromatografi gas) dari pasien yang mabuk akut.

Prinsip Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum Manusia, plasma, Darah Utuh atau Urin

Metode enzimatik dijelaskan oleh Gadsen RH dan al. Skema reaksi adalah sebagai berikut:

Komposisi Reagen Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum Manusia, plasma, Darah Utuh atau UrinPerbandingan ADH dan NAD+/ Alkohol dipertahankan tinggi sehingga keseimbangan tercapai relatif cepat. Konversi etanol menjadi asetaldehida berlangsung dengan cepat. Suatu “trapping agent” digunakan untuk mendorong reaksi ke kanan dengan pembentukan kompleks asetaldehida. Absorbansi NADH, sebanding dengan konsentrasi alkohol dalam spesimen, diukur dengan pembacaan titik akhir pada 340 nm.

Komposisi Reagen Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum, plasma, Darah Utuh atau Urin Manusia

Vial 1 Enzim Koenzim

NAD+ >= 2.4 mmol/L

(Nicotinamine adenine dinucleotide phosphate)

ADH >= 25.000 IU/L

(Alkohol dehidrogenese)

TRIS Buffer pH 8.65 +- 0.1 pada suhu 25° C

Stabiliser

Pengawet

Vial R2 STANDAR

Ethanol; sekitar 100 mg/dL (21.7 mmol/L)

Persiapan Reagen Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum, plasma, Darah Utuh atau Urin Manusia

Buka tutup vial 1 dengan hati-hati. Tambahkan segera ke botol vial R1 air demineralisasi sebanyak volume yang tertera pada label vial tersebut. Homogenkan secara perlahan kemudian tunggu hingga larut sempurna sebelum menggunakan reagen R1 (Kira-kira 10 menit)

The Balance / Emily Roberts

Stabilitas dan Penyimpanan

Simpan pada 2-8°C tertutup rapat dalam botol asli dan jauh dari cahaya.

Standar (botol R2) : transfer jumlah yang diminta, tutup botol dengan baik dan simpan pada 2-8°C.
Ketika disimpan dan digunakan seperti yang dijelaskan, reagen yang belum dibuka (vial R1) dan standar (vial R2) stabil pada tanggal kedaluwarsa yang tertera pada label.
Setelah dilarutkan dan bebas dari kontaminasi:

Reagen kerja (vial R1) stabil selama 7 hari Buang reagen apa saja (vial R1) jika keruh atau jika absorbansi pada 340 nm > 0,500.

Jangan gunakan reagen kerja (vial R1) setelah tanggal kedaluwarsa yang tertera pada label kit.

Pengumpulan dan Penanganan Sampel Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum, plasma, Darah Utuh atau Urin Manusia

Urine, Serum, plasma, darah lengkap (penggunaan alkohol swab tidak boleh digunakan selama pengumpulan spesimen darah). Gunakan heparin, Potassium oxalate, EDTA, Sodium citrate atau fluoride sebagai antikoagulan.

Stabilitas di seluruh darah (tanpa natrium fluorida sebagai pengawet): pada 18-25 ° C hingga 2 hari, pada 2-8 ° C hingga 2 minggu, pada -15 ° C hingga 4 minggu.
Stabilitas dalam darah utuh (dengan Sodium fluoride sebagai pengawet): pada 18-25 ° C hingga 2 minggu, pada 2-8 ° C hingga 3 bulan, pada -15 ° C hingga

Spesimen harus tetap tertutup untuk menghindari hilangnya penguapan ke atmosfer.

Prosedur Pemeriksaan Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum, plasma, Darah Utuh atau Urin Manusia

Diamkan reagen dan spesimen pada suhu kamar.

Prosedur Pemeriksaan Cara 1: Serum, plasma, Urine(Tanpa deproteinisasi)

Pipet ke dalam tabung reaksi 5 mL:	Blanko	Standar	Assay
Reagen Kerja (botol R1)	3 mL	3 mL	3 mL
Air demineralisasi	10 mL
Standar (botol R2)		10 mL
Spesimen			10 mL
Mencampur. Inkubasi selama 10 menit pada suhu 37°C atau 15 menit pada suhu 30°C atau 30 menit pada suhu kamar. Baca absorbansi pada 340 nm (atau Hg 334) terhadap blanko reagen. Reaksi stabil selama 2 jam (lihatGANGGUAN).

Catatan:

Urin : Direkomendasikan untuk melakukan blanko spesimen (10 L spesimen + 3 mL air, baca terhadap air). Kemudian kurangi absorbansi blanko spesimen dari absorbansi assay (baca terhadap blanko reagen).

Prosedur Pemerisaan Cara 2 : darah utuh, sangat ikterik, serum atau atau mendung plasma hemolisis(Dengan deproteinisasi)

1-Persiapan supernatan

Pipet dalam tabung sentrifuse	Standar	Spesime
Solusi TCA 62,5 g/L	1.8 mL	1.8 mL
Standar (botol R2)	200 mL
Spesimen		200 mL

Tutup tabung. Campur dengan kuat. Biarkan selama 5 menit.

Sentrifugasi selama 5 menit pada 2000-3000 RPM. (Jangan centrifuge Standar).

2-Pengujian

Pipet ke dalam tabung reaksi 5 mL:	Blanko	Standar	Assay
Reagen Kerja (botol R1)	3 mL	3 mL	3 mL
Air demineralisasi	100 mL
Standar diencerkan TCA		100 mL
Supernatan			10 0mL
Mencampur. Inkubasi selama 10 menit pada suhu 37°C atau 15 menit pada suhu 30°C atau 30 menit pada suhu kamar. Baca absorbansi pada 340 nm (atau Hg 334) terhadap blanko reagen. Reaksi stabil selama 2 jam (lihatGANGGUAN).

Perhitungan Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum, plasma, Darah Utuh atau Urin Manusia

Hitung hasilnya sebagai berikut :

Tanda Klinis Pemeriksaan Kuantitatif Alkohol dalam Serum, plasma, Darah Utuh atau Urin Manusia

tanda klinis pada spesimen pemeriksaan alkohol metanol pada serum plasma manusia

Tingkat alkohol hampir tidak terdeteksi pada subjek yang berpantang.

Tidak semua individu mengalami tingkat disfungsi SSP yang sama pada tingkat alkohol dalam darah yang sama. Batas hukum konsentrasi alkohol dalam darah untuk mengemudikan kendaraan bermotor berbeda dalam fungsi dari negara yang bersangkutan.

Interferensi

Studi interferensi yang dilakukan pada serum menunjukkan tidak ada interferensi dengan Prosedur Cara 1:

Plasma atau serum ikterik, hemolisis atau keruh yang lebih tinggi dapat dideproteinisasi sebelum melakukan pengujian.PROSEDUR MANUAL).

Sumber :

Biolabo. (2022). Alkohol Metanol. Maizy ; France.

Info Laboratorium Medik