Pewarna Methylene Blue Loeffler: Pengenalan, Prinsip, Komposisi, Persiapan, Prosedur Pewarnaan, Interpretasi Hasil, dan Catatan Penting

Table of Contents

 

Foto : universe84a.com

INFOLABMED.COM - Pewarna Methylene Blue Loeffler merupakan pewarna metakromatik dan oleh karena itu dipilih untuk pewarnaan metakromatik terutama untuk Corynebacterium diphtheriae dan juga sebagai kontra pewarna dalam pewarnaan tahan asam. 

Di bawah ini adalah pembahasan mengenai pengenalan, prinsip, komposisi, persiapan, prosedur pewarnaan, interpretasi hasil, serta catatan penting terkait pewarna metilen biru Loeffler.

Pengenalan Pewarna Methylene Blue Loeffler

Pewarna Methylene Blue Loeffler adalah pewarna metakromatik yang digunakan untuk identifikasi presumtif agen etiologi difteri, Corynebacterium diphtheriae. 

Metakromasia adalah fenomena atau sifat bahan biologis tertentu yang memberi warna berbeda dari pewarna yang digunakan, dan kondisi seperti itu secara khas terlihat pada Corynebacterium diphtheriae, disebabkan oleh akumulasi polifosfat terpolimeris dalam konsentrasi tinggi di dalam sel. 

Keadaan ini muncul sebagai granula polifosfat yang berwarna biru tua, dikelilingi oleh sitoplasma yang berwarna biru lebih ringan.

Granula-granula ini sering disebut sebagai tubuh Babes-Ernst atau granula metakromatik. 

Sel itu sendiri dibedakan oleh penampilan berpita atau berbutir. Pewarna Methylene Blue Loeffler juga merupakan kontra pewarna dalam pewarnaan tahan asam; di mana bakteri Non-Tahan Asam dan bahan latar belakang muncul berwarna biru.

Prinsip Pewarna Methylene Blue Loeffler

Prinsip Pewarna Methylene Blue Loeffler adalah sebagai berikut:

• Digunakan dalam identifikasi presumtif agen etiologi difteri, Corynebacterium diphtheriae.
• Metakromasia merupakan fenomena yang terjadi karena akumulasi polifosfat terpolimeris dalam konsentrasi tinggi di dalam sel, yang menyebabkan granula polifosfat berwarna biru tua.
• Sebagai kontra pewarna dalam pewarnaan tahan asam, di mana bakteri Non-Tahan Asam dan bahan latar belakang muncul berwarna biru.

Komposisi Pewarna Methylene Blue Loeffler

Komposisi Pewarna Methylene Blue Loeffler adalah sebagai berikut:

• Methylene blue: 0.5 gram
• Ethanol (alkohol etil), 95%: 30 ml
• Air suling: 100 ml

Persiapan Pewarnaan Methylene Blue Loeffler

Langkah-langkah persiapan pewarna metilen biru Loeffler adalah sebagai berikut:

1. Timbang metilen biru pada selembar kertas bersih.
2. Larutkan pewarna dalam sekitar 30 ml air.
3. Transfer pewarna ke botol coklat bersih.
4. Tambahkan alkohol dan sisa air.
5. Aduk rata.
6. Label botol dan simpan di tempat gelap pada suhu ruangan.

Prosedur Pewarnaan Methylene Blue Loeffler

Prosedur pewarnaan pewarna metilen biru Loeffler adalah sebagai berikut:

1. Biarkan bercak coba Corynebacterium diptheriae pada usapan tenggorokan mengering udara dan perbaiki dengan panas lembut.
2. Rendam bercak dengan pewarna metilen biru Loeffler selama 1 menit.
3. Bilas dengan air ledeng.
4. Keringkan dengan lap, kemudian periksa di bawah objektif pembesaran minyak.

Interpretasi Hasil Pewarnaan Methylene Blue Loeffler

Interpretasi hasil pewarnaan dengan pewarna metilen biru Loeffler adalah sebagai berikut:

• Granula metakromatik bakteri: Biru tua
• Sitoplasma: Biru pucat
• Strain Kontrol: Granula metakromatik berwarna biru tua sedangkan sitoplasma berwarna biru pucat.

Catatan Penting Mengenai Pewarna Methylene Blue Loeffler

Beberapa catatan penting yang perlu diperhatikan terkait dengan Pewarna Methylene Blue Loefflerr adalah sebagai berikut:

• Over pewarnaan tidak disarankan karena dapat mengurangi kontras antara bakteri dan latar belakang, atau antara sitoplasma dan granula.
• Beberapa strain bakteri seperti Propionibacterium, Actinomyces, dan bentuk-bentuk streptokokus pleomorfik mungkin meniru penampilan yang diwarnai khas dari C. diphtheriae.

Pewarna Methylene Blue Loeffler adalah pewarna metakromatik yang penting dalam identifikasi bakteri, terutama Corynebacterium diphtheriae.

 Dengan pemahaman yang baik tentang pengenalan, prinsip, komposisi, persiapan, prosedur pewarnaan, interpretasi hasil, dan catatan penting terkait pewarna ini, praktisi laboratorium dapat menggunakan teknik ini dengan efektif dalam diagnosis mikrobiologi.***